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核心技术简介

      以质粒为载体,构建IL-21跨膜蛋白K562工程细胞。该工程细胞经过辐照后,模拟人体的骨髓微环境,例如:网状结构、信号系统等。经过辐照后的工程细胞作为滋养细胞用于原代NK、CIK及iNKT细胞的高效、大规模和定向扩增激活。


(图)高效大规模定向扩增系统

      K562工程细胞作为滋养细胞定向激活特定效应细胞(NK、CIK、iNKT)的信号系统(IL-21-STAT3),特定效应细胞(NK、CIK、iNKT)被激活后,细胞分裂,1变2,2变4…… 直到临床所需用量。



技术的安全性

      K562工程细胞经过致死剂量(100Gy)辐照;K562工程细胞同时也是NK、CIK、iNKT细胞的靶细胞;扩增体系中K562工程细胞的量只限于扩增所需的NK、CIK、iNKT细胞,使得扩增后的NK、CIK、iNKT细胞中没有任何滋养细胞。离开了该工程细胞,NK、CIK、iNKT细胞将不会生长。这是一个三重保险,确保NK、CIK、iNKT细胞扩增技术的安全性。


扩增后NK细胞的功效

      在NK细胞扩增的过程中,NK细胞同时被激活 (例如NKp30、 NKp46、 CD16 和NKG2D的表达增加),使其杀伤功能显著增强。扩增后的NK细胞端粒酶活性增强,端粒长度增长,NK细胞始终保持在一个年轻的状态,避免了因细胞扩增而引起的早衰。



扩增后CIK细胞的功效

      在多种细胞因子(IFN-γ、CD3单抗等)作用下,部分外周血淋巴细胞可以被定向诱导并大量增殖成为CIK细胞(cytokine-induced killer)。 因CIK细胞表面表达CD3和 CD56蛋白质,该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强,对人体的副作用很小。CIK细胞兼具有T淋巴细胞的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点,CIK细胞是抗肿瘤免疫治疗采取的重要细胞之一。尤其对手术后或放、化疗后患者治疗效果显著,能消除残留微小的转移病灶,防止癌细胞扩散和复发,提高机体免疫力。

      然而通常采用的扩增方案(例如:CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等)培养一段时间后获得的CIK细胞纯度低,通常只有30%左右;细胞的端粒酶活性变弱,端粒长度变短,细胞有早衰现象。中赢生物最新的CIK细胞扩增方案中采用了中赢生物的独家专利技术,扩增后CIK细胞纯度大大提高,可以达到70%以上(图1);扩增后细胞端粒酶的活性与通常的方案比有显著的上升(图2)。



扩增后iNKT细胞的功效

      iNKT细胞(invariant nature killer T)是T淋巴细胞中独特的亚群。它们表达恒定的TCRVα14与NK细胞的部分标识。iNKT细胞也被认为是经典的NKT细胞。iNKT细胞与多种肿瘤和自身免疫性疾病有关, 在这些肿瘤患者和病人体内iNKT细胞的数量显著减少,激活iNKT 细胞能显著改善肿瘤和多种疾病的症状。 目前国内外还没有一个成熟的技术能将iNKT细胞数量扩增到多次临床用量,而采用中赢生物的专利技术扩增的iNKT细胞数量远远超过人体数量的总和,能够满足多次临床治疗的需求。扩增后的iNKT细胞纯度达到95%以上(图1),为临床使用的安全性提供了保障。


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